Мир коров
Каталог статей
| Главная » Статьи » Генетика крупного рогатого скота |
МАРКЕР BОLA - DRB3 у айрширов и голштинов(Часть 5)
1. Голштинские и айрширские быки - производители существенно от-личаются друг от друга по частотам встречаемости BoLA-DRB3 ал-лелей и генотипов. Так, в профиле айрширской породы преобладают Н/Н генотипы (65,49%), а голштинской - Н/Ч и Ч/Ч (33,44 и 34,47% соответственно). Наиболее типичными для голштинов являются BoLA-DRB3 *3, *8, *11, *16, *22, *24 аллели; для айрширов - BoLA-DRB3*1, *3, *7, *8, *18 и *27 аллели. 2. Безусловное лидерство в распространении среди голштинов принад-лежит BoLA-DRB3 *24 (аллель встречен с частотой 22, 02%); у айр-широв частота встречаемости аллеля BoLA-DRB3 *7 составляет 26,99 %; 115 из 293 (или 32,25%) быков голштинской породы в тех или иных сочетаниях несут в своём генотипе аллель BoLA-DRB3*24 и 49 из 113 (43,36%) быков айрширской BoLA-DRB3*7. 3. Для наиболее распространённых BoLA-DRB3 аллелей и генотипов характерны временные подъёмы и спады частот встречаемости. 4. Не выявлено значимых различий в BolA-DRB3 профилях быков, принадлежащих к различным линиям. Установлено, что страна про-исхождения, а вернее принятая там селекционная доктрина, опреде-ляет генетические особенности поступающих быков – производите-лей. 5. Возможно использование BoLA-DRB3 генотипирования для предва-рительной оценки быков, данная технология позволяет повысить эф-фективность по сравнению с другими методами предварительной оценки более чем в два раза. 6. Разработан селекционно- генетический способ повышения продук-тивности и устойчивости крупного рогатого скота к персистентному лимфоцитозу. Экспериментальная проверка подобного подхода пока-зала повышение частоты встречаемости желательного генотипа Ч/У за одно поколение с 24,44 до 62,22%. 7. Обосновано использование маркера BoLA-DRB3 как дополнительно-го критерия при подборе быков, позволяющего снизить вероятность несоответствия «бык – стадо». этапы работы: 1. Выделение ДНК из крови животных. 2. Проведение ПЦР с праймерами к гену BoLA-DRB3 для получения фрагмента длиной 284 п.о. 3. Электрофорез продукта амплификации в агарозном геле. 4. Рестрикция фрагмента 284 п.о. ферментами RsaI, HaeIII, BstIY. 5. Электрофорез продуктов рестрикции в полиакриламидном геле (ПААГ). Геномная ДНК, выделенная из лейкоцитов крови, подвергается ПЦР с праймерами, позволяющими амплифицировать фрагмент гена BoLA-DRB3 размером 284 п.о. Праймеры имеют следующий состав: HLO-30 atс сtc tct ctg cag cac att tcc HLO-32 tсg ccg ctg cac agt gaa act сtc Амплифицированный фрагмент проанализировали методом электрофореза в агарозном геле (см. рис.). На рис. видно, что в положительном контроле ПЦР прошел хорошо, что свидетельствует о достаточном количестве в пробе дезоксинуклеозидтрифосфатов, Taq-ДНК-полимеразы, правильном составе буфера для полимеразной реакции. В образцах с ДНК из крови КРС видна ожидаемая полоса размером 284 п.о. и широкая полоса неизрасходованных в реакции праймеров.Фрагмент 284 п.о. далее расщепляли рестрицирующими эндонуклеазами RSAI, BstIY и/или HaeIII, с последующим электрофоретическим разделением полученной смеси и определением длин рестрикционных фрагментов (см. рис.). Так как рестриктазы имеют строго специфические места расщепления, то генетические различия в нуклеотидной последовательности ДНК между индивидуумами (т. е. полиморфизм на уровне ДНК) приведут к различному распределению сайтов рестрикции вдоль соответствующих молекул ДНК, а следовательно, к получению смесей продуктов рестрикции, в которых длина гомологичных фрагментов будет раз-личаться. Таким образом, полиморфизм ДНК будет тестироваться как полиморфизм длин рестрикционных фрагментов (ПДРФ). Для установления генетической устойчивости КРС к лейкозу необходимо выявить наличие аллелей гена BoLA-DRB3, ответственных за формирование иммунной реакции к вирусу. Аллельные варианты гена определяли согласно ранее полученным таблицам. Полученные результаты переданы в хозяйства для применения в процессе формирования поголовья КРС, генетически свободного от лейкоза. | |
| Просмотров: 377 | | |
| Всего комментариев: 0 | |
Приветствую Вас Гость
Форма входа |
|---|
Категории раздела | ||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
|
Поиск |
|---|
Мини-чат |
|---|
Друзья сайта |
|---|
|
|
Статистика |
|---|
Онлайн всего: 1 Гостей: 1 Пользователей: 0 |